Il test di Coombs
Cos'è un test di Coombs?
Il test di Coombs viene utilizzato per rilevare gli anticorpi contro i globuli rossi (eritrociti). Per la determinazione degli anticorpi viene utilizzato un cosiddetto siero di Coombs, ottenuto dal siero di conigli e sensibilizzato agli anticorpi umani.
Il test viene utilizzato se si sospetta anemia emolitica, incompatibilità Rh o poco prima di una trasfusione di sangue. L'anemia emolitica è una forma di anemia e l'incompatibilità Rhesus descrive un'incompatibilità del gruppo sanguigno.
Esistono due diversi tipi di test di Coombs, il test diretto e quello indiretto differiscono per indicazione ed esecuzione.
Le ragioni di un test di Coombs
Il test di Coombs diretto viene utilizzato se si sospetta anemia emolitica. L'anemia emolitica descrive l'anemia in cui le cellule del sangue si rompono prematuramente a causa di un danno.
Nelle malattie autoimmuni come il lupus eritematoso sistemico, l'artrite reumatoide o la leucemia linfatica cronica, si formano anticorpi diretti contro le cellule del sangue del corpo (i cosiddetti eritrociti). Il legame degli anticorpi porta alla rottura precoce delle cellule del sangue o all'aggregazione delle cellule del sangue nei vasi. Entrambi portano a un calo del valore dell'emoglobina.
Un'altra indicazione per il test di Coombs diretto è la malattia da haemolyticus neonatorum, qui si formano anticorpi contro il fattore rhesus nel corpo della madre rhesus-negativa. Se il nascituro è positivo per il rhesus, gli anticorpi di quello materno possono entrare nella circolazione del feto e iniziare un aumento della disgregazione delle cellule del sangue. I neonati si distinguono per una grave anemia e ittero.
Il test di Coombs viene utilizzato regolarmente nella medicina trasfusionale. Viene utilizzato per determinare i gruppi sanguigni prima di una trasfusione di sangue (test al letto del paziente), in cui un piccolo campione di sangue viene miscelato con vari sieri dei gruppi sanguigni A, B, AB e 0. Se il sangue rimane fluido, il sangue del paziente è compatibile con il gruppo sanguigno corrispondente. La trasfusione può essere eseguita.
Il test di Coombs indiretto può anche essere utilizzato per cercare anticorpi liberi nel corpo del paziente (test di ricerca degli anticorpi), ad es. durante i controlli di maternità, in preparazione a una trasfusione per pazienti oncologiche o persone che hanno già ricevuto una trasfusione di sangue.
Scopri tutto sull'argomento qui: Rh intolleranza.
La preparazione
In preparazione per il test di Coombs, vengono prima preparati i sieri con gli anticorpi che devono essere testati. Vengono inseriti in diverse provette o applicati su test card.
Nella pratica clinica quotidiana, ad es. con il test al posto letto ci sono già delle schede di prova predisposte che possono essere utilizzate immediatamente. Successivamente, il sangue viene prelevato dal paziente e preparato per il test. A seconda del tipo di test di Coombs che viene eseguito, occorrono le cellule del sangue o il siero (parte liquida del sangue) del paziente.
La sequenza
Se viene eseguito un test di Coombs diretto, i globuli rossi vengono filtrati dal sangue del paziente. Deve essere verificato se sono presenti anticorpi di tipo IgG su di essi, che causano anemia emolitica o incompatibilità del gruppo sanguigno nel corpo. Il siero di Coombs contiene anticorpi contro gli anticorpi IgG umani. La miscela viene riscaldata (incubata) a lungo. Se sono presenti anticorpi sui globuli rossi, si aggregano e il test diventa positivo.
Il test di Coombs indiretto è composto da due parti. L'obiettivo è determinare gli anticorpi che sono liberi nel sangue e non sono legati alle cellule del sangue.
Questa volta la parte liquida (siero) viene filtrata dal sangue del paziente. Innanzitutto, i globuli rossi vengono aggiunti al siero per il test. Se sono presenti anticorpi liberi nel siero, si legheranno ai globuli rossi. Questa reazione non è visibile. Solo nella seconda fase, come nel test di Coombs diretto, viene aggiunto e riscaldato il siero di Coombs con anticorpi contro gli anticorpi umani. Anche qui la soluzione si raggruppa se il risultato è positivo.
La valutazione
Se gli anticorpi sono combinati con un siero di Cooms adatto, gli anticorpi nel siero (parte liquida del sangue) si legano con gli anticorpi del paziente. Gli anticorpi sono a forma di Y, il che significa che possono sempre legare due partner di legame e quindi reticolare i globuli rossi tra loro. Viene creato un grande accumulo di cellule del sangue. Questi grumi diventano visibili: il sangue si agglutina (grumi) e il test è positivo.
Se il paziente non ha gli anticorpi appropriati, il siero rimane liquido. Non puoi vedere alcun cambiamento: il test è negativo.
Quali sono le alternative?
Un'alternativa al test di Coombs è il metodo immunologico ELISA (test immunoassorbente legato all'enzima), in cui alcuni anticorpi sono contrassegnati da un enzima. Questo anticorpo viene aggiunto alla soluzione in esame. Se gli anticorpi marcati reagiscono con gli anticorpi nella soluzione in esame, l'enzima legato viene attivato e produce un colorante. Le provette corrispondenti cambiano colore: il test è positivo.
Oltre alla procedura ELISA, esiste anche il WESTERN blot, che viene spesso utilizzato come test di conferma per un ELISA positivo.
